Germinação asseptica de embriões de Phoenix canariensis Asseptical germination of Phoenix Canariensys Zigotic embryos

A germinação asseptica e proliferação de callo de Phoenix canariensis, planta amplamente usada como ornamental na bacia do Mediterraneo, foi conseguida no laboratorio da P.Plants com 3mg/L de 2iP e 10mg/L de 2,4D em meio MS respectivamente.

-As sementes são bastante grandes e robustas pelo que podem ser desinfectadas sem grandes cuidados em soluções desinfectantes fortes tendo apenas o cuidado de remover a polpa alojada na ranhura que atravassa longitudinalmente a semente. Isto é importante pois é inserindo o bisturi numa das extremidades destas ranhuras que se consgue abrir a semente sem danificar o embrião que tem uma forma cilindrica e o tamanho da cabeça de uma mosca domestica.

O endosperma é extremamente duro e remover o embrião não é muito facil por isso todo o cuidado é pouco ( não raramente alguns sairam disparados para fora da camara de fluxo laminar) :).

-A propagação clonal deste tipo de planta é virtualmente impossivel pois ao contrario de outro tipo de palmeiras, esta nem sequer produz rebentação lateral tendo uma dominancia absolutamente apical. Assim sendo a unica forma de propagação é por calogenese e posterior organogenese em tecido caloso ou embriogenese somatica.

Neste momento na peak plants estamos a preparar um segundo ensaio em que se vão aclimatizar alguns embriões germinados. Os restantes irão ser convertidos em callo de forma a obter quantidades sufucientes de callo para ensaios de embriogenese somatica e organogenese directa visto que no ultimo ensaio as quantidades de material eram manifestamente pequenas para se efectuar uma matriz de testes com vista a afnação do meio de cultura.

The asseptical germination and callogenisis of Phoenix canariensis, a widely used ornamental in the mediterranean basin, was achieved a the peak plants laboratory with 3mg/L of 2iP and 10mg/L of 2,4D respectively in MS Medium.

The seeds are quite big and robust, therefore they can be desinfected without any problems with more strong desinfectants, it is in any case important to completely remove any pulp from the central gap that crosses the seed longitudinally. It´s on one the edges of the gap that you must insert the scalpel in order to safely open the seed and remove the embryo without damaging it. This is not always easy because the endosperm is quite hard and some of the seeds end up in the other side of the room :).

- The clonal propagation of this plant is virtually impossible by tradicional methods because unlike other palm trees, Phoenix has a strickly apical dominance and does not produce any rootable material. For this reason the only way to obtain clones from this plant is by direct organogenesis in callus tissue or somatic embriogenisis. At the moment we are preparing a second trial in wich we intent to produce a more significant amount of callus so that we can test some of the available information concerning somatic embriogenisis and direct organogenisis in callus.

Phormiums ja crescem in vitro Phormiuns growing in vitro

Phormiums are already growing in vitro

Phormium tenax or "New Zealand flax" is a tipicaly hard to propagate plant because the only traditional method is the division of adult plants into 2 or 3 propagules wich will take another year or 2 to dividable again.

-At Peak Plants we managed to germinate Phormium seeds in vitro with 0.5 mg of BAP and thus obtain asseptical cultures. The number of plants do not yet allow a complete protocol to be written, but the main problem seems to be the adjustment of the medium due to the existence of some phenolization in the outer leaves, Zeatin seems to be more active them BAP for propagation, but since we havent yet achieved the most proper Medium formulation it is wise to wait and gather more results.

Here are some important hints:

- do not use very strong desinfecting solutions in the seeds as they are very fragile

- preferably try to collect the seeds before seed capsule opens so that you can use a strong desinfectant in the outer capsule and a mild desinfection for the seeds

- although it has been reported that the variegated caracteristic is hard to mantain in vitro, all germinated seeds have this property on the first stages of life

- most likely there will be some bacterial and fungal infections in some of the in vitro seedlings, this can be surpassed by consecutive baths in a sterilized water and cuted garlic goves solution.

O Phormium planta para a qual ainda não encontrei um nome tradicional concesual no nosso pais, é uma planta tipicamente dificil de propagar dado que apenas dividindo individuos adultos com uma porção de raiz se consegue propagar vegetativamente. Por outro lado estes individuos não devem ser novamente divididos em menos de um a dois anos o que torna a propagação em massa dificil.

Na Peak Plants conseguimos germinar com sucesso sementes de Phormium com cerca de 0.5 mg/L de BAP e assim obter culturas assepticas desta espécie. O numero de plantas em stock não permite para já a elaboração de um protocolo completo, mas até à data o principal problemas parece ser a fenolização constante proveniente do par mais externo de folhas pelo que um ajuste do meio é essencial. A zeatina parece ser mais activa para a fase de propagação mas até uma optima condição das plantas ser obtida é prematuro avaliar com exactidão a influencia dos diversos reguladores de crescimento.

Aqui ficam alguns conselhos:

- Não use desinfectantes fortes nas sementes pois estas são extremamente delicadas

- De preferencia tente recolher as sementes antes da abertura da capsula que as alberga e desinfectar a capsula com agua oxigenada fazendo posteriormente uma desinfecção mais suave sobre as sementes

- Apesar de ter sido reportado que a forma variegada é dificil de manter in vitro por perda desta caracteristica é muito provavel que esse seja o aspecto das plantulas germinadas in vitro nos primeiros estádios com ausencia da cor verde caracteristica.

- É provavel a incidencia de infecções mesmo após a primeira repicagem de material não infectado, este problema pode ser ultrapassado com varios banhos em solução de agua estéril com dentes alho desinfectados e cortados debaixo da água em pequenos pedacinhos.

Micropropagação de rosas miniatura Micropropagation of Minitaure Rose

Micropropagation of miniature Rose plants (yellow variety) has been successefully achieved at Peak Plants Labs with a simple MS basal salts and Vitamins added with 1.0 mg/L of BAP, unfortunatelly we had some problems with endogenous infections wich together with the low quantity of starting material reduced the stock to a debilitated group of a few. Currently we are trying to overcome this problem with antibiotics such as cefotaxime and nistatin. The material has a good in vitro performance but the use of antibiotics greatly increases Labour so we are thinking of starting from Zero with this culture, instead of trying to recover the debilitated explants.

In previous months we had similar problems with an Escalonia variety, but Escalonia keeps proliferating massively independent of Medium contamination.

More work has to be done....

A micropropagação de Rosa miniatura (variedade amarela) foi alcançada com sucesso em meio MS basal com vitaminas adicionado de 1mg/l de BAP, infelismente tivemos alguns problemas com infecçoes que em conjunto com a a baixa quantidade de material reduziu o stock a um grupo de alguns explantes debilitados. Actualmente estamos a tentar ultrapassar este problema com o uso de antibioticos como a cefotaxima e a nistatina.

O material tem uma boa performance in vitro mas o uso the antibióticos aumenta substancialmente a mão de obra, como tal, nest momento ponderamos a hipotese de começar do zero com estas culturas em vez de recuperar os explantes debilitados.

Há alguns meses tivemos um problema semelhate com Escalonias mas estas proliferam massivamente independentemente da contaminação endogena.

Enfim é preciso trabalhar mais...

Micropropagation with LEDs

-Since 2007 Peak Plants has been deeply interested for the use of LEDs in tissue culture, this is mainly for the high potencial of costs reduction and improved photossyntesis. Also in the end of the same year Peak Plants developed with an engineer at LedTek China, three prototypes specifically designed for three diferent photossyntetic aplications.
-Due to the high lack of investidors in this area (micropropagation) in Portugal, Peak Plants has kept most of the research to its own use but the idea of using LEDs is more alive then ever. The prices and diversity of LED products in the market are increasing its competitive value, and the use of fluorescent lamps at our lab is near to an end.

Micropropagação com LEDs

Desde de 2007 que a Peak Plants procura as melhores soluções para micropropagação com LEDs tendo inclusivé concebido 3 protótipos com a empresa Chinesa LedTek para este fim.

Dada a manifesta ausência de parceiros de investimento neste setor de mercado em Portugal a Peak Plants, vê-se neste momento obrigada a manter para si mesma as pesquisas efectuadas.

- No entanto, e como era esperado a diversificação dos produtos baseados na tecnologia de LEDs e a queda progressiva no preço de tais produtos e sua consequente penetração nos mercados, fazem com que a ideia esteja mais viva do que nunca e o uso de lampadas florescentes no nosso laboratório tem os dias contados.

Parceiros e interessados procuram-se....

Micropropagação e cultura de tecidos na blogosfera

Bem vindos ao espaço público da Peak Plants onde tudo o que diz respeito a cultura de tecidos vegetais, pode ser discutido e partilhado.

Welcome to the Peak Plants open space where everything concerning plant tissue culture can be discussed and shared.